NEB助力新型冠狀病毒 2019-nCoV 快速診斷與研究
在 21 世紀(jì)的第一個(gè)十年，非典爆發(fā)。2003 年 7 月的數(shù)據(jù)顯示，SARS 病毒在全球 27 個(gè)國(guó)家造成了 8096 例感染病例，774人死亡。十年后，MERS 病毒引起的中東呼吸綜合征，又在 27 個(gè)國(guó)家?guī)砹?1728 例確診病例，奪走了 624 條生命。
2020 年關(guān)將至，冠狀病毒再一次洶涌襲來。2019 年 12 月 30 日，武漢市衛(wèi)生健康委員會(huì)醫(yī)政醫(yī)管處發(fā)布《關(guān)于做好不明原因肺炎救治工作的緊急通知》，通知稱武漢部分醫(yī)療機(jī)構(gòu)陸續(xù)出現(xiàn)不明原因肺炎病人，臨床表現(xiàn)均表現(xiàn)為病毒性肺炎或肺部感染。2020 年伊始，在科研人員的快速應(yīng)對(duì)下，檢出一種新型冠狀病毒，并獲得該病毒的全部基因組序列。世界衛(wèi)生組織正式將造成武漢不明原因肺炎疫情的新型冠狀病毒命名為：2019-nCoV。
▲
十七年前抗擊 SARS 的領(lǐng)軍人物鐘南山院士以 83 歲高齡再次掛帥出征，于昨日接受央視采訪時(shí)指出，目前已能肯定新型的冠狀病毒能“人傳人”。幾個(gè)小時(shí)前，武漢市衛(wèi)健委也發(fā)布消息，指出“武漢共有 15 名醫(yī)務(wù)人員確診為新型冠狀病毒感染的肺炎病例”。鐘南山院士表示：當(dāng)前防控最有效的辦法就是早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療、早隔離。
從首例新型肺炎報(bào)告后的第 14 天，世界衛(wèi)生組織（WHO）宣布，已收到中國(guó)分享的從武漢不明原因病毒性肺炎病例中檢測(cè)到的新型冠狀病毒基因序列信息。到基因序列公布后的 1~2 天里，若干診斷公司根據(jù)病毒的 RNA 序列，先后宣布完成了新型冠狀病毒檢測(cè)試劑盒的開發(fā)。這些均得益于目前先進(jìn)的測(cè)序手段及快速的診斷方法。當(dāng)前，對(duì)冠狀病毒的診斷測(cè)試包括 RT-PCR，實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄 PCR（rRT-PCR），逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增（RT-LAMP）以及實(shí)時(shí) RT-LAMP。1 月 17 日，WHO 針對(duì)發(fā)布了新型冠狀病毒診斷方案：Diagnostic detection of 2019-nCoV by real-time RT-PCR（Charité Virology, Berlin, Germany）。
/////////
▲
近期，快速的診斷方案使各地新增病例得到快速確診，這增加了大家對(duì)疾病的警惕和防護(hù)，也可使流行病學(xué)監(jiān)測(cè)高效進(jìn)行，以采取有效的預(yù)防措施和實(shí)施適當(dāng)?shù)目共《局委?。?duì)于新型冠狀病毒的深入研究和快速診斷方案，NEB 作為分子生物學(xué)領(lǐng)域的頭部供應(yīng)商，能夠提供從病原體核酸提取，到二代測(cè)序建庫(kù)、RT-qPCR 和 RT-LAMP 診斷試劑的一整套完整解決方案。
01 核酸提取
|
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
|
T2010S |
Monarch Total RNA Miniprep Kit |
50 preps |
- 全能：集樣本保存、細(xì)胞裂解、gDNA 去除為一體
- 廣泛適用：適用于培養(yǎng)細(xì)胞、血液、哺乳動(dòng)物組織和病毒，及難裂解樣本，如細(xì)菌、酵母和植物。
- 高質(zhì)量：A260/280 和 A260/230 比值均≥1.8，高 RIN 值和極低 gDNA 殘留（gDNA 去除柱和 DNase I）。
- 高效：可純化總 RNA 包含小 RNA，通過改變結(jié)合條件可以選擇性地篩選＜200 nt 的 RNA，包含 miRNA、5S rRNA 和 tRNA。
- 下游應(yīng)用：提取純化得到的 RNA 可用于 RT-qPCR、cDNA 合成、RNA-seq、Northern blot 分析等下游實(shí)驗(yàn)。
02 RT-qPCR
| 貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
|
E3005E |
Luna Universal One-Step RT-qPCR Kit |
2500 rxns |
|
E3005L |
Luna Universal One-Step RT-qPCR Kit |
500 rxns |
|
E3005S |
Luna Universal One-Step RT-qPCR Kit |
200 rxns |
|
E3005X |
Luna Universal One-Step RT-qPCR Kit |
1000 rxns |
|
E3006E |
Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit |
2500 rxn |
|
E3006L |
Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit |
500 rxns |
|
E3006S |
Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit |
200 rxns |
|
E3006X |
Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit |
1000 rxns |
|
M0372L |
Antarctic Thermolabile UDG |
500 units |
|
M0372S |
Antarctic Thermolabile UDG |
100 units |
|
M0280L |
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) |
5,000 units |
|
M0280S |
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) |
1,000 units |
- 使用簡(jiǎn)便：每個(gè)產(chǎn)品對(duì)應(yīng)一種應(yīng)用，方便的預(yù)混液形式及易操作的實(shí)驗(yàn)步驟
- 性能優(yōu)異：Luna 系列產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格的優(yōu)化及檢測(cè)以確保特異性、靈敏度、精確性及可重復(fù)性
- 防污染：預(yù)混液中包含 dUTP，qPCR 前使用 NEB 的南極熱敏 UDG （NEB#M0372）或 UDG（NEB#M0280）進(jìn)行預(yù)處理以防止產(chǎn)物殘留污染。
- 避免加樣誤差：肉眼可見的藍(lán)色惰性示蹤染料，避免加樣失誤
- 室溫建立體系：溫啟動(dòng)的反轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng) Taq 酶共同提升了反應(yīng)特異性和穩(wěn)定性
03 等溫?cái)U(kuò)增
| 貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
|
M0275L |
Bst DNA Polymerase, Large Fragment |
8,000 units |
|
M0275M |
Bst DNA Polymerase, Large Fragment |
8,000 units |
|
M0275S |
Bst DNA Polymerase, Large Fragment |
1,600 units |
|
M0275V |
Bst DNA Polymerase, Large Fragment |
800 units |
|
M0328S |
Bst DNA Polymerase, Full Length |
500 units |
|
M0374L |
Bst 3.0 DNA Polymerase |
8,000 units |
|
M0374M |
Bst 3.0 DNA Polymerase |
8,000 units |
|
M0374S |
Bst 3.0 DNA Polymerase |
1,600 units |
|
M0537L |
Bst 2.0 DNA Polymerase |
8,000 units |
|
M0537M |
Bst 2.0 DNA Polymerase |
8,000 units |
|
M0537S |
Bst 2.0 DNA Polymerase |
1,600 units |
|
M0538L |
Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase |
8,000 units |
|
M0538M |
Bst 2.0 WarmStart? DNA Polymerase |
8,000 units |
|
M0538S |
Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase |
1,600 units |
|
M0330L |
Bsu DNA Polymerase, Large Fragment |
1,000 units |
|
M0330S |
Bsu DNA Polymerase, Large Fragment |
200 units |
|
E1700L |
WarmStart LAMP Kit (DNA & RNA) |
500 rxns |
|
E1700S |
WarmStart LAMP Kit (DNA & RNA) |
100 rxns |
|
M1800L |
WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix (DNA & RNA) |
500 rxns |
|
M1800S |
WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix (DNA & RNA) |
100 rxns |
|
M0249L |
RecA |
1,000 ug |
|
M0249S |
RecA |
200 ug |
|
M2401S |
ET SSB |
50 ug |
|
M0300L |
T4 Gene 32 Protein |
500 ug |
|
M0300S |
T4 Gene 32 Protein |
100 ug |
04 反轉(zhuǎn)錄
| 貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
|
E5310S |
OneTaq RT-PCR Kit |
30 rxns |
|
E5315S |
OneTaq One-Step RT-PCR Kit |
30 rxns |
|
E6300L |
ProtoScript First Strand cDNA Synthesis Kit |
150 rxns |
|
E6300S |
ProtoScript First Strand cDNA Synthesis Kit |
30 rxns |
|
E6560L |
ProtoScript II First Strand cDNA Synthesis Kit |
150 rxns |
|
E6560S |
ProtoScript II First Strand cDNA Synthesis Kit |
30 rxns |
|
M0253L |
M-MuLV Reverse Transcriptase |
50,000 units |
|
M0253S |
M-MuLV Reverse Transcriptase |
10,000 units |
|
M0277L |
AMV Reverse Transcriptase |
1,000 units |
|
M0277S |
AMV Reverse Transcriptase |
200 units |
|
M0368L |
ProtoScript II Reverse Transcriptase |
10,000 units |
|
M0368S |
ProtoScript II Reverse Transcriptase |
4,000 units |
|
M0368X |
ProtoScript II Reverse Transcriptase |
400,00 units |
|
M0380L |
WarmStart RTx Reverse Transcriptase |
250 rxns |
|
M0380S |
WarmStart RTx Reverse Transcriptase |
50 rxns |
|
S1230S |
Random Primer 6 |
1.0 A260 units |
|
S1254S |
Random Primer 9 |
1.0 A260 units |
|
S1316S |
Oligo d(T)18 mRNA Primer |
5.0 A260 units |
|
S1327S |
Oligo d(T)23 VN |
1.0 A260 units |
|
S1330S |
Random Primer Mix |
100 μl (60 μM) |
05 二代測(cè)序
NEB 公司擁有十年開發(fā)二代測(cè)序建庫(kù)產(chǎn)品的經(jīng)驗(yàn)，NEBNext 系列產(chǎn)品不斷在簡(jiǎn)化工作流程、最小起始量、更高的文庫(kù)產(chǎn)量和質(zhì)量等方面進(jìn)行優(yōu)化，助力更多科研工作者針對(duì)病毒樣本進(jìn)行深入研究。
NEBNext 單細(xì)胞/超低起始量 RNA 文庫(kù)制備試劑盒（NEB #E6420）可直接從單個(gè)細(xì)胞或 2 pg-200 ng 的 RNA 構(gòu)建成全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄本的高質(zhì)量文庫(kù)。優(yōu)化的cDNA 合成 & 擴(kuò)增模塊（NEB #E6421）包含模板轉(zhuǎn)換，可單管完成從細(xì)胞裂解到 cDNA 的全部實(shí)驗(yàn)流程。同時(shí)該試劑盒中的 NEBNext Ultra? II FS DNA 文庫(kù)制備試劑盒（NEB #E7805、E6177）可用于逆轉(zhuǎn)錄后的病毒 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建，并提供 DNA 片段化試劑，將 DNA 片段化、末端修復(fù)和加 dA 尾優(yōu)化到一步，可在單管中完成，省去了繁瑣的純化步驟，進(jìn)一步防止病毒樣品損失。
| 貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
|
E6420S/L |
NEBNext 單細(xì)胞/超低起始量 RNA 文庫(kù)制備試劑盒 |
24/96 rxns |
|
E6421S/L |
NEBNext 單細(xì)胞/超低起始量 cDNA 合成 & 擴(kuò)增模塊 |
24/96 rxns |
|
E7805S/L |
NEBNext Ultra II FS DNA 文庫(kù)制備試劑盒 - 含片段化酶 |
24/96 rxns |
|
E6177S/L |
NEBNext Ultra II FS DNA 文庫(kù)制備試劑盒 - 含片段化酶/含純化磁珠 |
24/96 rxns |
▲
溫馨提示：病毒流感高發(fā)期，請(qǐng)務(wù)必注意個(gè)人衛(wèi)生，勤洗手，保持居住環(huán)境的清潔，多開窗通風(fēng)，盡量少去人多密集的公共場(chǎng)所，出門記得戴口罩。
- 上一篇：新品上市-Corning MSC xeno-free SFM 2020/3/20
- 下一篇：博士德致敬醫(yī)學(xué)界感恩回饋活動(dòng) 2020/3/20
